Cullin-RING泛素連接酶（CRL）是泛素連接酶中規(guī)模較大的一類(lèi)，功能多樣，參與調(diào)控?cái)?shù)百種細(xì)胞過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn)，CRL4DCAF-1在調(diào)控核糖體生物合成方面扮演著源遠(yuǎn)流長(zhǎng)的角色，這一功能在進(jìn)化歷程中得以保留，其調(diào)控目標(biāo)之一是PWP1蛋白。這意味著CRL4DCAF-1可能通過(guò)調(diào)控PWP1的活性來(lái)影響核糖體的形成與功能。這一發(fā)現(xiàn)為進(jìn)一步理解核糖體生物合成的調(diào)控機(jī)制提供了新的線索和切入點(diǎn)。

圖1 在成年的 dcaf-1(RNAi) 生殖系中，滅活（inactivation）挽救了 dcaf-1 生殖細(xì)胞缺陷，并且使得FOG-1和FOG-3水平的增加。a）這里是在25°C下生長(zhǎng)，并經(jīng)過(guò)對(duì)照組、dcaf-1組和ddb-1組RNAi處理的fog-1(q253ts)突變成年個(gè)體的DIC圖像。生殖系的遠(yuǎn)端區(qū)域位于左上方（有一個(gè)星號(hào)標(biāo)記）。b）這是在成年個(gè)體中，表達(dá)3xMyc-FOG-1和FOG-3::3xFLAG，并分別通過(guò)對(duì)照RNAi（頂部）或dcaf-1 RNAi（中部）處理后，用Hoechst 33258 DNA染料和抗-Myc和抗-FLAG抗體標(biāo)記的解剖過(guò)的生殖腺的免疫熒光圖像。用dcaf-1 RNAi處理的野生型成年個(gè)體（底部）被用作Myc和FLAG染色的陰性對(duì)照。生殖腺的遠(yuǎn)端末端位于左側(cè)（用星號(hào)標(biāo)記）。c） 這是在經(jīng)過(guò)對(duì)照RNAi或dcaf-1 RNAi處理的成年個(gè)體的生殖系遠(yuǎn)端和近端區(qū)域中的3xMyc::FOG-1和FOG-3::3xFLAG水平的圖表。

該實(shí)驗(yàn)采用鑫圖Dhyana 400BSI相機(jī)進(jìn)行高質(zhì)量圖像數(shù)據(jù)采集。該相機(jī)采用背照式sCMOS結(jié)構(gòu)，其峰值量子效率高達(dá)95%，讀出噪聲低至1.1 e-，可以在低光條件下快速捕捉微弱的熒光信號(hào)；6.5 μm像元尺寸能很好地平衡高NA顯微鏡的空間采樣率和靈敏度的需求，對(duì)樣本進(jìn)行清晰、高動(dòng)態(tài)成像；鑫圖第三代Dhyana 400BSI相機(jī)還提供高達(dá)100 [email protected]的速度，可以更快速捕捉動(dòng)態(tài)變化的信號(hào)，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)觀察。憑借其出色的性能，Dhyana 400BSI相機(jī)可適用于多種苛刻的熒光成像需求。

參考文獻(xiàn)

Rahman M M, Balachandran R S, Stevenson J B, et al. The Caenorhabditis elegans cullin-RING ubiquitin ligase CRL4DCAF-1 is required for proper germline nucleolus morphology and male development[J]. Genetics, 2023: iyad126.

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